本發(fā)明公開(kāi)了生產(chǎn)次丹參酮二烯的釀酒酵母基因工程菌及其構建方法與應用。本發(fā)明所提供的基因工程菌是按照包括以下步驟的方法構建的:在出發(fā)釀酒酵母中引入外源的丹參柯巴基焦磷酸合酶基因(SmCPS)和丹參次丹參酮二烯合酶基因(SmKSL)得到生產(chǎn)次丹參酮二烯的重組釀酒酵母,記作重組釀酒酵母ZD T 000和ZD T 010。在此基礎上,提高3 羥基 3 甲基戊二酰輔酶A還原酶、萜類(lèi)調控因子蛋白UPC2、牻牛兒牻牛兒基焦磷酸合酶、法呢基焦磷酸合酶中的一種或幾種蛋白的活性,構建得到24株(ZD T 001~ZD T 008,ZD T 011~ZD T 018,ZD T 021~ZD T 028)高產(chǎn)次丹參酮二烯的重組釀酒酵母菌株。本發(fā)明所構建的釀酒酵母ZD Tans 001在好養氧條件下,發(fā)酵6天時(shí)可生產(chǎn)487.91mg/L的次丹參酮二烯。
院屬單位:中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所
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