本項目組于全球首次開(kāi)發(fā)了基于熒光素酶的系列食源性致病菌快速檢測系統。利用該系 統本項目組已實(shí)現了金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌 O157、奇異變形桿菌、產(chǎn) 氣腸桿菌、肺炎克雷伯氏桿菌的單獨和混合檢測,最低檢測限達 10 個(gè) copy,與熒光定量 PCR 法相比具有更高的特異性,檢測時(shí)間可縮短至 2-3 小時(shí),且設備、試劑成本相對較低,與現 有系列食源性致病菌檢測系統相比,具有極大的競爭優(yōu)勢。此外,本項目相關(guān)應用可進(jìn)一步 擴展至其他未知食源、醫源性微生物污染快速檢測中,具有巨大的潛在應用價(jià)值。
技術(shù)優(yōu)勢:
目前,已開(kāi)發(fā)了針對食品食源性致病菌的多種快速檢測方法,其中基于食源性致病菌特 征 DNA 片段的檢測方法被認為最具有應用潛力。
本項目組充分考慮了食品中微生物污染的特點(diǎn)、現有檢測方法的不足,以及生物元件熒 光素酶和鋅指蛋白的特性,基于合成生物學(xué)模塊組裝與優(yōu)化的理念,有針對性設計了基于生 物發(fā)光反應的食源性致病菌快速檢測方法,通過(guò)設計不同的探針可實(shí)現對不同食源性致病菌 的檢測,或通過(guò)設計針對食源性致病菌的通用性探針實(shí)現對不同污染微生物的同時(shí)檢測,可 進(jìn)一步加快食源性致病菌的檢出率。將上述技術(shù)用于食品生產(chǎn)過(guò)程中各類(lèi)食源性致病菌的靈 敏快速檢測中,可使食源性致病菌檢測時(shí)間由現行培養方法需時(shí)24-48 小時(shí)縮短至2-3 小時(shí), 且本系統不僅可以用于食品中食源性致病菌的檢測,而且有望擴展應用到其他未知食源、醫 源性微生物污染快速檢測中,具有較大的潛在應用價(jià)值。
應用概況:
本項目組已經(jīng)構建完成針對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌 O157、奇異變 形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、肺炎克雷伯氏桿菌的熒光素酶快速檢測系統,并實(shí)現對上述 6 種食源 性致病菌的單獨和混合檢測。